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細胞株培養(yǎng)上清液中營養(yǎng)物質(zhì)和細胞代謝物分析

原載自:www.85t3.com[行情動態(tài)]  2022-11-11  瀏覽次數(shù):989

   對于細胞株培養(yǎng)時上清液的收集,把要收集上清的細胞重新在一次性培養(yǎng)板中培養(yǎng),如果是貼壁細胞的話,在收集前24小時,改用不全培養(yǎng)基培養(yǎng),即用不加血清的培養(yǎng)基。收集的時候,用移液槍吸取上清即可。
  細胞培養(yǎng)基是人工模擬細胞在體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境,為促進細胞生長增殖提供物質(zhì)基礎(chǔ),是培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。合成細胞培養(yǎng)基是用化學(xué)成分明確的試劑配制
  的培養(yǎng)基,是目前常用的一類培養(yǎng)基,其組分穩(wěn)定,主要包括糖類、必需氨基酸、維生素、無機鹽類等。培養(yǎng)基組分的變化,對細胞生長會產(chǎn)生一定影響,如細胞生長形態(tài)、分裂速度等。同時,適宜的培養(yǎng)基組成與優(yōu)選的細胞培養(yǎng)工藝對于提高蛋白類藥物的產(chǎn)率,保證細胞培養(yǎng)批次之間的一致性、穩(wěn)定關(guān)鍵質(zhì)量屬性等因素至關(guān)重要。因此,尋求一類合適的培養(yǎng)基組成,對細胞株培養(yǎng)具有重大意義。
  細胞生長狀態(tài)的分析,除形態(tài)學(xué)觀察外,還可對細胞培養(yǎng)上清液中細胞代謝物進行分析,通過考察細胞上清液中營養(yǎng)物和代謝物的變化,判斷細胞在生長增殖過程中狀態(tài)的優(yōu)劣。鑒于此開發(fā)出了“細胞培養(yǎng)上清液方法包”,該技術(shù)可在短時間內(nèi)同時分析數(shù)十種細胞培養(yǎng)上清液營養(yǎng)成份和代謝物的相對豐度變化。
  使用高效液相色譜儀和三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用,結(jié)合“細胞培養(yǎng)上清液方法”建立了細胞培養(yǎng)上清液中營養(yǎng)物質(zhì)和細胞代謝物的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜的同時分析方法,可為相關(guān)研究人員評估細胞生長狀態(tài)、改進培養(yǎng)基組分提供參考。

 

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